Quy trình kỹ thuật cấy chuyển vi khuẩn là gì?

Quy trình kỹ thuật cấy chuyển vi khuẩn

Quy trình kỹ thuật cấy chuyển vi khuẩn là mô tả kỹ thuật cấy chuyển vi khuẩn từ môi trường này sang môi trường khác.

• Quy trình kỹ thuật nhuộm Gram
• Quy trình kỹ thuật nội soi trực tràng trên cận lâm sàng
• Kỹ thuật đo niệu động học là gì?

Quy trình kỹ thuật cấy chuyển vi khuẩn là gì?

Nguyên tắc của quy trình kỹ thuật cấy chuyển vi khuẩn là gì?

Các chuyên gia Cao đẳng Y dược tại Trường Cao đẳng Y dược Pasteur giải đáp câu hỏi như sau: Cấy chuyển chủng vi khuẩn là kỹ thuật vô trùng, chuyển vi sinh vật từ môi trường đang nuôi cấy sang môi trường mới với nhiều mục đích khác nhau: lấy khuẩn khóm riêng rẽ, giữ chủng, lưu chủng,…để lưu giữ chủng, tùy loại vi khuẩn cần cấy chuyển định kỳ sau một số khoảng thời gian khác nhau.

• Có 4 hình thức chính đối với cấy chuyển:

+ Cấy chuyển từ môi trường đặc sang môi trường đặc

+ Cấy chuyển từ môi trường đặc sang môi trường lỏng

+ Cấy chuyển từ môi trường lỏng sang môi trường đặc

+ Cấy chuyển từ môi trường lỏng sang môi trường lỏng.

Trang thiết bị, vật tư quy trình kỹ thuật cấy chuyển vi khuẩn

Trang thiết bị

• Tủ an toàn sinh học (ATSH) cấp 2
• Kính hiển vi quang học.
• Máy ly tâm
• Máy trộn, lắc
• Ống vô trùng có nắp đậy.
• Đèn cồn, que cấy, lam kính, lamen, bút viết kính, dầu soi kính, giấy thấm dầu, Pipet Pasteur vô trùng.

Quy trình kỹ thuật cấy chuyển vi khuẩn sau khi thực hiện

Sinh phẩm hóa chất

Các môi trường nuôi cấy cần thiết.

Kiểm tra chất lượng quy trình kỹ thuật cấy chuyển vi khuẩn

Các hóa chất được các kỹ thuật viên Cao đẳng Xét nghiệm kiểm tra theo Quy trình kiểm tra chất lượng sinh phẩm trong lâm sàng, hóa chất, lưu lại kết quả sau khi kiểm tra.

An toàn quy trình kỹ thuật cấy chuyển vi khuẩn

Y sĩ đa khoa 2020 chia sẻ quy trình thực hiện phương pháp cấy chuyển vi khuẩn

• Thực hiện thao tác với mẫu bệnh phẩm trong tủ ATSH.
• Sử dụng các thiết bị bảo hộ cá nhân.

Nội dung thực hiện quy trình kỹ thuật cấy chuyển vi khuẩn

Chuẩn bị

• Mặc áo bảo hộ, đội mũ, đeo khẩu trang, que cấy tay
• Chuẩn bị tủ sạch, que cấy, đèn cồn, đĩa nguyên ủy, ống, đĩa môi trường mới. – Ghi các thông tin sau lên đĩa hoặc ống nuôi cấy mới: Mã bệnh phẩm, ngày cấy, tên chủng vi khuẩn.

Cấy chuyển

• Lấy khuẩn khóm:

+ Với khuẩn khóm trên đĩa thạch: Dùng tay trái mở đĩa nuôi cấy một khoảng đủ để thao tác, dùng que cấy chạm vào chóp 1 khuẩn khóm mọc riêng rẽ, rút que cấy ra, đậy nắp đĩa lại, giữ que cấy bằng tay phải.

Các giai đoạn cấy chuyển khuẩn

+ Với khuẩn khóm trên ống thạch nghiêng: Mở nắp ống, hơ miệng ống gần ngọn lửa đèn cồn, dùng que cấy lấy vi khuẩn mọc trên bề mặt thạch nghiêng, đậy nắp ống, giữ que cấy bằng tay phải.

• Cấy chuyển từ đĩa thạch hoặc ống thạch nghiêng sang đĩa thạch mới (dùng kỹ thuật cấy phân vùng).
• Lấy đĩa môi trường mới (đĩa cấy chuyển), mở một khoảng vừa đủ để thao tác, giữ que cấy song song với mặt thạch, ria vùng 1 (3-5 đường). Đốt que cấy và để nguội tự nhiên
• Mở đĩa cấy chuyển, ria vùng 2 từ vùng 1, ria khoảng 3-5 đường. Đốt que cấy và để nguội tự nhiên.
• Mở đĩa cấy chuyển, ria vùng 3 từ vùng 2, ria khoảng 3-5 đường.
• Đốt que cấy và để nguội tự nhiên.
• Mở đĩa cấy chuyển, ria vùng 4 từ vùng 3, ria khoảng 3-5 đường, tránh chạm vào vùng 1.
• Đậy đĩa cấy chuyển, đốt que cấy và để đĩa vào tủ ấm trong điều kiện phù hợp. Chú ý:

Kỹ thuật viên xét nghiệm cũng có thể cấy trên đĩa thạch mới thành các vùng nhỏ để tăng sinh, hoặc cấy đếm trên đĩa thạch mới tùy vào mục đích.

+ Mở nắp ống thạch nghiêng, hơ miệng ống gần ngọn lửa đèn cồn.

+ Đưa que cấy cấy vào chỗ thấp nhất của mặt thạch, ria trên mặt thạch nghiêng, vừa ria vừa đưa dần que cấy cấy lên cao đến hết mặt thạch. Có hai cách cấy trên thạch thường: chỉ cấy trên mặt thạch nghiêng và cấy cả phần đứng và phần nghiêng + Rút que cấy ra, hơ miệng ống gần ngọn lửa đèn cồn, đậy nắp.

+ Lấy khuẩn khóm.

+ Mở nắp ống môi trường nuôi cấy mới, hơ lửa miệng ống. Để nghiêng khoảng 45⁰.

+ Đưa que cấy cấy vào thành môi trường nuôi cấy đối diện với môi trường lỏng ở khu vực sẽ có môi trường khi dựng thẳng ống (chú ý, trong quá trình đưa que cấy, không chạm vào thành hay miệng ống). Cũng có thể đưa đầu que cấy có vi khuẩn nhúng vào môi trường lỏng.

+ Nghiền que cấy vào thành ống cho vi khuẩn dính vào thành ống là được.

+ Hơ lửa miệng ống, đậy nắp và để ống nuôi cấy mới vào khay.

+ Đốt que cấy.

+ Kiểm tra lại các nắp ống đảm bảo đủ chặt (không quá chặt).

+ Đặt ống nuôi cấy vào môi trường thích hợp.

– Cấy chuyển từ môi trường lỏng sang môi trường đặc:

+ Đốt và để que cấy nguội tự nhiên, cầm que cấy bằng tay phải (nếu thuận tay phải)

+ Cầm ống môi trường lỏng (chứa vi sinh vật), dùng ngón út tay phải kẹp nút bông hoặc nắp xoáy, mở ống.

+ Hơ miệng ống gần ngọn lửa đèn cồn.

+ Đưa que cấy vào môi trường lỏng (đưa ống về phía que cấy, không đưa que cấy về phía ống), lấy một que cấy dung dịch nuôi cấy (tùy thể tích), thao tác đưa que cấy vào và rút que cấy ra đều không chạm vào miệng hay thành ống.

+ Hơ lửa miệng ống, đậy nắp (di chuyển hoặc xoay ống chứa, không di chuyển nắp ống).

+ Để ống nuôi cấy vi sinh vật vào khay.

+ Lấy đĩa môi trường mới (đĩa cấy chuyển), mở một khoảng vừa đủ để thao tác, giữ que cấy song song với mặt thạch, ria vùng 1 (3-5 đường)

+ Đốt que cấy và để nguội tự nhiên.

+ Mở đĩa cấy chuyển, ria vùng 2 từ vùng 1, ria khoảng 3-5 đường.

+ Đốt que cấy và để nguội tự nhiên.

+ Mở đĩa cấy chuyển, ria vùng 3 từ vùng 2, ria khoảng 3-5 đường.

+ Đốt que cấy và để nguội tự nhiên.

+ Mở đĩa cấy chuyển, ria vùng 4 từ vùng 3, ria khoảng 3-5 đường, tránh chạm vào vùng 1.

+ Đậy đĩa cấy chuyển lại, đốt que cấy.

– Cấy chuyển từ môi trường lỏng sang môi trường lỏng (Xem hình 4):

+ Đốt và để que cấy nguội tự nhiên, cầm que cấy bằng tay phải + Cầm ống nguyên ủy bằng tay trái, dùng ngón út tay phải mở nắp ống nguyên ủy

(Di chuyển ống, không di chuyển tay cầm nắp ống), hơ lửa miệng ống

+ Đưa que cấy vào môi trường lỏng chứa vi sinh vật (đưa ống về phía que cấy, không đưa que cấy về phía ống), lấy một que cấy dung dịch nuôi cấy (tùy thể tích), thao tác đưa que cấy vào và rút que cấy ra đều không chạm vào miệng hay thành ống.

+ Hơ lửa miệng ống, đậy nắp (di chuyển hoặc xoay ống chứa, không di chuyển nắp ống), đặt ống vào khay.

+ Mở nắp ống môi trường nuôi cấy mới, hơ lửa miệng ống.

+ Đưa que cấy cấy vào trong môi trường nuôi cấy, không chạm vào thành hay miệng ống.

+ Hơ lửa miệng ống, đậy nắp và để ống nuôi cấy mới vào khay.

– Đặt các môi trường vào tủ ấm 37 độ C, thời gian thích hợp.

Theo Y sĩ đa khoa – Trường Cao đẳng Y dược Pasteur tổng hợp