Quy trình thử nghiệm Optochin trong phòng thí nghiệm

Quy trình thử nghiệm Optochin 

Quy trình optochin được thực hiện giúp một số bác sĩ Cận lâm sàng kiểm tra sự nhạy cảm của vi khuẩn với optochin. Từ đó, bác sĩ điều trị sẽ đưa ra phác đồ điều trị hiệu quả.

• Quy trình kỹ thuật cấy chuyển vi khuẩn là gì?
• Quy trình thử nghiệm bacitracin được thực hiện như thế nào?
• Quy trình kỹ thuật nhuộm Gram

Hình ảnh phế cầu khuẩn

Phạm vi áp dụng quy trình optochin

Quy trình này được áp dụng ở Phòng vi sinh của một số cơ sở y tế chuyên khoa.

Trách nhiệm của người làm quy trình optochin

• Người thực hiện: Đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành Vi sinh y học.
• Nhân viên nhận định, giám sát và phê duyệt kết quả: Có trình độ đại học hoặc sau đại học về chuyên ngành bác sĩ, cử nhân Vi sinh y học.

Nguyên tắc thực hiện quy trình optochin

Bác sĩ Cận lâm sàng tại Trường Cao đẳng Y dược Pasteur cho biết, Streptococcus pneumoniae (phế cầu) là vi khuẩn hay gặp ở đường hô hấp, tính chất tan máu (tiêu huyết) không thể phân biệt được chúng với một số loại cầu khuẩn và Lactobacilli. Xác định sự nhạy cảm với optochin có thể phân biệt được phế cầu và một số cầu khuẩn tan máu (tiêu huyết) α khác. Một số vi khuẩn Gram dương, khóm giống phế cầu sẽ tạo ra một vòng ức chế rõ ràng xung quanh khoanh optochin, còn một vài loại vi khuẩn tan máu (tiêu huyết) α khác thì không tạo vòng ức chế.

Trang thiết bị, vật tư được sử dụng trong quy trình optochin

Trang thiết bị

• Tủ an toàn sinh học (ATSH) cấp 2
• Kính hiển vi quang học.
• Máy ly tâm
• Máy trộn, lắc
• Ống vô trùng có nắp đậy.
• Đèn cồn, que cấy nhọn, lam kính, lamen bút viết kính, dầu soi kính, giấy thấm dầu.
• Bộ thuốc nhuộm Gram – Pipet Pasteur vô trùng.

Sinh phẩm hóa chất – Khoanh giấy optochin

• Thạch 5% máu cừu.
• Một số hóa chất được kiểm tra theo Quy trình kiểm tra chất lượng sinh phẩm, hóa chất, lưu lại kết quả sau khi kiểm tra.
• Chứng:

Thạch máu

+ Chứng Dương: Streptococcus pneumonia ATCC 49619

+ Chứng Âm: Enterococcus faecalis ATCC 29212

An toàn của quy trình optochin là gì?

• Thực hiện thao tác với mẫu bệnh phẩm trong tủ ATSH.
• Sử dụng một số thiết bị bảo hộ cá nhân.

Nội dung thực hiện quy trình optochin

Giảng viên Cao đẳng Xét nghiệm tại Trường Cao đẳng Y dược Pasteur chia sẻ quy trình optochin như sau:

• Thử nghiệm với khóm thuần nhất

+ Sử dụng que cấy lấy một khóm tan máu (tiêu huyết) α riêng rẽ để ria trực tiếp hoặc pha huyền dịch vi khuẩn có độ đục 0,5 McFarland.

+ Sử dụng que cấy ria vi khuẩn hoặc que gòn lấy huyền dịch vi khuẩn ria một số đường sát nhau lên đĩa thạch máu, lặp lại ít nhất 2 lần.

+ Sử dụng panh vô khuẩn đặt một khoanh optochin lên bề mặt thạch máu.

+ Thử nghiệm từ bệnh phẩm.

+ Sử dụng que cấy vô trùng ria bệnh phẩm lên đĩa thạch máu.

+ Sử dụng panh vô khuẩn đặt một khoanh optochin vào rìa của vùng nguyên ủy.

• Ấn nhẹ panh xuống khoanh giấy để khoanh giấy bám chắc vào đĩa thạch. Để vào tủ ấm 35 – 37 độ C với 5 -10% CO₂, đọc kết quả sau 18-24 giờ.
• Nếu có đường kính vùng ức chế thì đo bằng thước chia mm hoặc đo bằng thước kẹp (caliper).

Kết quả thí nghiệm

Diễn giải kết quả và báo cáo

• Thử nghiệm dương tính (Nhạy cảm với optochin): Đường kính vùng ức chế ≥14mm (15 tới 30mm).
• Nhạy cảm mức trung gian với optochin: Đường kính vùng ức chế nhỏ hơn 14mm.
• Đề kháng với optochin: Không có vùng ức chế.
• Một vài khóm nằm trong vùng ức chế có thể là phế cầu hoặc không.

Lưu ý (cảnh báo)

• Trên y học lâm sàng đã xuất hiện một vài chủng thử nghiệm cho kết quả trung gian với Optochin có thể là phế cầu.

Lưu trữ hồ sơ

• Ghi chép rõ ràng kết quả và một số thông tin quy định vào phiếu trả lời kết quả và sổ kết quả xét nghiệm.
• Lưu trữ một số biểu mẫu phiếu kiểm tra chất lượng theo đúng quy định của khoa.

Nguồn tham khảo: Kỹ thuật xét nghiệm vi sinh lâm sàng (Ban hành kèm theo Quyết định số 1539/QĐ-BYT ngày 20/4/2017 của Bộ trưởng Bộ Y tế)

Y sĩ đa khoa 2020 tổng hợp